想知道在做PCR電泳時(shí)加loading buffer 的作用是什么?多點(diǎn)少點(diǎn)有沒(méi)有影響 ,我的體系是20ul,我加2ul,6X的loading buffer 混合后 取7ul上樣可以嗎
想知道在做PCR電泳時(shí)加loading buffer 的作用是什么?多點(diǎn)少點(diǎn)有沒(méi)有影響 ,我的體系是20ul,我加2ul,6X的loading buffer 混合后 取7ul上樣可以嗎
其他人氣:730 ℃時(shí)間:2020-04-07 12:13:59
優(yōu)質(zhì)解答
博凌科為-為你loading buffer的作用不僅僅是有染色,loading buffer的成分往往還有甘油或者蔗糖這是最關(guān)鍵的一點(diǎn)是要將你的樣的密度加大,只有加大密度才能在你點(diǎn)樣的時(shí)候,使得你的樣品比TAE的密度大,從而沉的點(diǎn)樣孔里邊.所以你的問(wèn)題就可以解釋了,如果是6X的,那么應(yīng)該是5ul的樣+1ul的loading buffer,如果你加少了,那么很可能你的樣品就不能很好的沉到點(diǎn)樣孔中.這樣很明顯,可能跑到膠里邊的樣和你點(diǎn)進(jìn)去的樣的量是不同的,很有可能有一部分樣漂出了點(diǎn)樣孔
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