在分子水平上提供一種純化和擴(kuò)增特定DNA片段的方法.常含有目的基因,用體外重組方法將它們插入克隆載體,形成重組克隆載體,通過轉(zhuǎn)化與轉(zhuǎn)導(dǎo)的方式,引入適合的寄主體內(nèi)得到復(fù)制與擴(kuò)增,然后再?gòu)暮Y選的寄主細(xì)胞內(nèi)分離提純所需的克隆載體,可以得到插入DNA的許多拷貝,從而獲得目的基因的擴(kuò)增.
克隆(clone,clon)一詞源于希臘文Klon,原意為樹木的枝條.在生物學(xué)中其名詞含義系指一個(gè)細(xì)胞或個(gè)體以無性繁殖的方式產(chǎn)生一群細(xì)胞或一群個(gè)體,在不發(fā)生突變的情況下,具有完全相同的遺傳性狀,常稱無性繁殖(細(xì)胞)系;其動(dòng)詞(clone,cloned,cloning)含義指在生物體外用重組技術(shù)將特定基因插入載體分子中,即分子克隆技術(shù).
將DNA片段(或基因)與載體DNA分子共價(jià)連接,然后引入寄主細(xì)胞,再篩選獲得重組的克隆,按克隆的目的可分為DNA和cDNA克隆兩類.
cDNA克隆是以mRNA為原材料,經(jīng)體外反轉(zhuǎn)錄合成互補(bǔ)的DNA(cDNA),再與載體DNA分子連接引入寄主細(xì)胞.每一cDNA反映一種mRNA的結(jié)構(gòu),cDNA克隆的分布也反映了mRNA的分布.特點(diǎn)是:
①有些生物,如RNA病毒沒有DNA,只能用cDNA克?。?br/>②cDNA克隆易篩選,因?yàn)閏DNA庫(kù)中不包含非結(jié)構(gòu)基因的克隆,而且每一cDNA克隆只含一個(gè)mRNA的信息;
③cDNA能在細(xì)菌中表達(dá).cDNA僅代表某一發(fā)育階段表達(dá)出來的遺傳信息,只有基因文庫(kù)才包含一個(gè)生物的完整遺傳信息.
5、 如何克隆抗生素生物合成基因?6、 基因工程在抗生素生產(chǎn)中有哪些應(yīng)用?
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生物人氣:641 ℃時(shí)間:2020-02-03 07:51:11
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