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  • 篩選產(chǎn)β-半乳糖苷酶的菌種

    篩選產(chǎn)β-半乳糖苷酶的菌種
    具體的培養(yǎng)基配方,
    ONPG要怎么加,什么時(shí)候加!
    生物人氣:109 ℃時(shí)間:2020-06-13 07:44:24
    優(yōu)質(zhì)解答
    1.平板篩選培養(yǎng)基:胰蛋白胨15g,蛋白胨5g,K2HPO4 2.5g,酵母浸膏1g,NaCl 5g,瓊脂15g,X-gal0.1g,蒸餾水1 000ml,pH 7.7.2.
    2.搖瓶篩選培養(yǎng)基:乳糖1%,胰蛋白胨15g,豆蛋白胨5g,K2HPO4 2.5g,酵母浸膏3g,NaCl 5g,蒸餾水1000ml,pH 7.7.2.
    3.酶活力測(cè)定方法
    將pH6.5的磷酸緩沖液500μl和0.25%的ONPG 200μl加入比色管,在25℃的溫度下溫浴5min,加入適當(dāng)稀釋的粗酶液0.5ml,反應(yīng)10min,加入800μl 5%Na2CO3終止反應(yīng),蒸餾水定容至10ml,用分光光度計(jì)420nm測(cè)定OD值,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算酶活.
    在上述條件下1ml粗酶液1min催化水解ONPG生成1μmol鄰硝基苯酚(ONP)的量,定義為1U.
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