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  • 感受態(tài)細(xì)胞制備時(shí)對(duì)菌體細(xì)胞的濃度大小有要求嗎,是不是越大越好呢

    感受態(tài)細(xì)胞制備時(shí)對(duì)菌體細(xì)胞的濃度大小有要求嗎,是不是越大越好呢
    其他人氣:520 ℃時(shí)間:2020-08-16 23:06:01
    優(yōu)質(zhì)解答
    不是.雖然菌體濃度越大,細(xì)胞的絕對(duì)數(shù)量越多,但這只是在一定的范圍內(nèi),感受態(tài)的效率主要和菌體的狀態(tài)有關(guān).
    制作感受態(tài)的菌體最好處于對(duì)數(shù)期,溫度不同,處于對(duì)數(shù)期的OD值也不同,一般37℃搖菌,制作感受態(tài)的OD最好在0.4左右,不要超過0.6.謝謝您的答復(fù)。我是想請(qǐng)教一下在保證制作感受態(tài)的菌體處于對(duì)數(shù)期的前提下,對(duì)其濃度有要求嗎?也就是說我需要怎樣將對(duì)數(shù)期的菌體濃縮,濃縮至什么樣的程度才可以,是否越濃越好呢在保證制作感受態(tài)的菌體處于對(duì)數(shù)期的前提下,你可以適當(dāng)?shù)貙?duì)其進(jìn)行濃縮,增加感受態(tài)的絕對(duì)數(shù)量以增加轉(zhuǎn)化效率,可是這樣做出來的感受態(tài)的數(shù)量就減少了,而且菌體濃度太大,你用試劑懸浮的時(shí)候會(huì)很難。你自己取個(gè)適合的值吧。關(guān)于怎樣濃縮,不同的方法制作過程也不同,你可以去搜一下鈣處理法、Inoue法、Nishimura法、RbCl法以及一步法,參考一下。制作時(shí)全程低溫很重要。
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