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  • DNS法測定還原糖.葡糖糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線要怎么做?

    DNS法測定還原糖.葡糖糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線要怎么做?
    其他人氣:352 ℃時(shí)間:2020-04-07 01:31:38
    優(yōu)質(zhì)解答
    用EXECL表,用那個(gè)里面的曲線橫豎坐標(biāo)按他說的標(biāo)出來就出來曲線了我想知道的是實(shí)驗(yàn)操作10mg/mL標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液:
    精密稱取無水葡萄糖1.0000置80mL蒸餾水中攪拌溶解,待完全溶解后定容至100mL。標(biāo)記為10mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液,同時(shí)標(biāo)記配制日期,4℃條件下保存。
    DNS試劑的配制
    稱取3,5-二硝基水楊酸31.50g緩慢加入5000mL蒸餾水中,不斷攪拌,水浴至45℃,逐步加入1000mL氫氧化鈉溶液(e),不斷攪拌至溶液清澈透明(在加入氫氧化鈉溶液過程中,溶液溫度不要超過48℃)。再逐步加入四水酒石酸鉀鈉910.0g、苯酚25.0 g、無水亞硫酸鈉25.0 g,繼續(xù)45℃水浴加熱,同時(shí)補(bǔ)水3000mL,不斷攪拌,至上述物質(zhì)完全溶解后,冷卻至室溫,并定容到10000 mL。用濾布過濾,將濾液儲存于棕色瓶中,標(biāo)識名稱和配制日期,避光,室溫保存7天后可以使用。有效期6個(gè)月。

    分析步驟:
    標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:
    取8支試管按下表加入相關(guān)試液后再加入1.5mLDNS試劑,充分搖勻,置沸水浴中反應(yīng)5min。迅速冷卻至室溫,用水定容至5.0mL,用0號試管試液作對照,在540nm波長下測其它各試管試液的吸光度。以吸光度為縱坐標(biāo),以葡萄糖含量為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。


    試管號

    0

    1

    2

    3

    4

    5

    6

    7




    緩沖液加入量(μL )

    1000

    990

    985

    980

    975

    970

    965

    960




    葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液加入量(μL )

    0

    10

    15

    20

    25

    30

    35

    40




    葡萄糖含量(μg)

    0

    100

    150

    200

    250

    300

    350

    400
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