水—亞硝酸鹽的測定—萘乙二胺分光光度法
1 范圍
本方法適用于海水及河口水中亞硝酸鹽氮的測定.
2 原理
在酸性介質(zhì)中亞硝酸鹽與磺胺進行重氮化反應,其產(chǎn)物再與鹽酸萘乙二胺偶合生成紅色偶氮染料,于543nm波長處測定吸光度.
大量的硫化氫干擾測定,可在加入磺胺后用氮氣驅(qū)除硫化氫.
3 試劑
除非另作說明,所用試劑均為分析純,水為無亞硝酸鹽的二次蒸餾水或等效純水.
3.1 磺胺溶液,10g/L：稱取5g磺胺(NH2SO2C6H4NH2),溶于350mL鹽酸溶液（1+6）,用水稀釋至500mL,盛于棕色試劑瓶中,有效期為2個月.
3.2 鹽酸萘乙二胺溶液,1g/L：稱取0.5g鹽酸萘乙二胺(C10H7NHCH2CH2NH2•2HCl),溶于500mL水中,盛于棕色試劑瓶中于冰箱內(nèi)保存,有效期為1個月.
3.3 亞硝酸鹽氮標準溶液
3.3.1 亞硝酸鹽氮標準貯備溶液,100μg/mL-N：稱取0.4926g亞硝酸鈉(NaNO2,光譜純,預先在110℃烘1h,置于干燥器中冷卻至室溫)溶于少量水中,移入1000mL容量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻.加1mL三氯甲烷（CHCl3）,搖勻.貯于棕色試劑瓶中,于冰箱中保存.有效期為兩個月,此溶液1.00mL含100.0μgN.
3.3.2 亞硝酸鹽氮標準使用溶液,5.0μg/mL-N：移取5.0mL亞硝酸鹽氮標準貯備溶液（100μg/mL）于100mL容量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻.現(xiàn)用現(xiàn)配.此溶液1.00mL含5.0μgN.
4 儀器設備
4.1 分光光度計.
5 試樣制備
5.1 海水樣品可用有機玻璃或塑料采水器采集,經(jīng)0.45μm濾膜過濾后貯于聚乙烯瓶中,應從速分析,不能延遲3h以上,否則須快速冷凍至-20℃保存.樣品熔化后立即分析.詳見GB17378.3—1998.
注：濾膜應預先在0.5mol/L鹽酸溶液中浸泡12h,用純水沖洗至中性,密封待用.
5.2 試樣量
測定水樣用量50mL.
6 工作曲線的繪制
6.1.1 取6個50mL具塞比色管,分別加入0、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50mL亞硝酸鹽標準使用溶液（5.0μg/mL）,用水稀釋至刻度 ,搖勻.此標準系列各點的濃度分別為0、0.010、0.020、
0.030、0.040、0.050mg/L-N.
6.1.2 各加入1.0mL磺胺溶液(10g./L),混勻.放置5min.
6.1.3 各加入1.0mL鹽酸萘乙二胺溶液（1g/L）,混勻.放置15min.
注∶水樣加鹽酸萘乙二胺溶液后,須在2h內(nèi)測量完畢,并避免陽光照射.
6.1.4 用5cm吸收皿,以水作參比,于波長543nm處測量其吸光度Ai .其中O濃度為標準空白吸光度Ao
注∶溫度對測定的影響不顯著,但以10℃～25℃內(nèi)測定為宜.
6.1.5 以吸光度(Ai－AO)為縱坐標,亞硝酸鹽氮的濃度（ mg/L）為橫坐標繪制標準曲線.
6.2 水樣的測定
6.2.1 移取50.0mL已過濾的水樣于50mL具塞比色管中.
6.2.2 以下按第6.1.6.1.4條操作步驟測定水樣的吸光度Aw.
6.2.3 量取50.0mL二次去離子水于50 mL具塞比色管中,按第6.1.6.1.4條操作步驟測定試樣空白吸光度Ab.
6 結(jié)果計算
由吸光度（Aw－Ab）從標準曲線直接查得水樣中亞硝酸鹽氮的濃度（mg/L）或用線性回歸方程計算水樣中亞硝酸鹽氮的濃度,其計算公式如下：
An=Aw －Ab⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯（1）
由An值查工作曲線或按公式（2）計算水樣中亞硝酸鹽氮的濃度：baANNOn2−=−−ρ⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯（2）
式（2）中：
ρNo-2-N—水樣中亞硝酸鹽氮的濃度,mg/L；
An —水樣中亞硝酸鹽氮的吸光度；
a—標準曲線截距；
b—標準曲線斜率.