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　　實驗七 鄰二氮菲分光光度法測定水中微量鐵
　　[日期：2008-05-12] [字體：大 中 小]
　　一、實驗?zāi)康?br/>　　1.學(xué)習(xí)測定微量鐵的通用方法.
　　2.學(xué)習(xí)繪制吸收曲線,選擇測量波長.
　　3.熟悉用標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量的實驗技術(shù).
　　4.學(xué)會正確使用分光光度計.
　　二、實驗原理
　　鄰二氮菲是測定微量鐵的高靈敏性、高選擇性試劑.鄰二氮菲光度法是化工產(chǎn)品中微量鐵測定的通用方法.在酸度為 pH=2 9 的溶液中,鄰二氮菲和 Fe 2+ 生成穩(wěn)定的桔紅色配合物,λ max =508nm ,ε max =1.1 × 10 4 L /(mol · cm) ,在還原劑存在下,顏色可保持幾個月不變.鄰二氮菲與 Fe 3+ 也生成 3:1 配合物,呈淡藍(lán)色.因此在顯色之前,需要用鹽酸羥胺 ( 或抗壞血酸 ) 將全部的 Fe 3+ 還原為 Fe 2+ .
　　2Fe 3+ + 2NH 2 OH = 2Fe 2+ + N 2 ↑ + 2H 2 O + 2H +
　　三、儀器和試劑
　　儀器：分光光度計 容量瓶（ 25mL ,9 個） 吸量管（ 5mL ,1 支,用于鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液的移取） 移液管（ 10mL ,1 支,用于未知試液的移?。?br/>　　試劑：鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液 (40.0 μ g/mL ,用潔凈干燥的 100mL 燒杯,準(zhǔn)確稱取 3.454g 硫酸鐵銨 [NH 4 Fe(SO 4 ) 2 · 12H 2 O] ,加 30mL HCl 及 30mL 水,溶解后定量轉(zhuǎn)移至 1L 容量瓶中,加 300mL HCl ,加水至刻線,搖勻,作為貯備液.用前移取 100.0mL 貯備液至 1L 容量瓶中,用水稀釋至刻線 ) 鹽酸羥胺（ 100g /LNH 2 OH · HCl 溶液,兩周內(nèi)有效）鄰二氮菲溶液 ( 2.0g /L ,溫水溶解,避光保存,兩周內(nèi)有效,出現(xiàn)紅色時已不能使用 ) 乙酸鈉溶液（ 1.0mol/L)
　　四、實驗步驟
　　1.測繪吸收曲線
　　移取 2.00 mL 鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液,注入容量瓶,加 0.5mL 鹽酸羥胺溶液,搖勻,放置 2min ,加 1.0mL 鄰二氮菲溶液和 2.0mL 乙酸鈉溶液,加水至刻線,搖勻.以水為參比,在不同波長 ( 從 450 550nm ,每隔 10nm 測量一次吸光度,其中在 500 520nm 每間隔 5nm 測量一次 ) 下測量相應(yīng)的吸光度,將測量結(jié)果記入下表 :
　　λ /nm
　　450
　　460
　　470
　　480
　　490
　　500
　　505
　　510
　　515
　　520
　　530
　　540
　　550
　　A
　　在坐標(biāo)紙上以波長為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo)繪出吸收曲線.根據(jù)吸收曲線確定進(jìn)行測定的適宜波長.
　　此步實驗也可不單獨配制一份試液,而選用下步實驗中的第四份溶液進(jìn)行測定.
　　2.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
　　洗凈 5 只容量瓶,依次加入 0.50 、 1.00 、 1.50 、 2.00 、 2.50mL 鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液,各加入 0.5mL 鹽酸羥胺溶液,混勻.放置 2min 后,各加入 1.0mL 鄰二氮菲溶液和 2.0mL 乙酸鈉溶液,加水至刻線,混勻.以水為參比,在選定的波長下測定各溶液的吸光度,將測得的數(shù)據(jù)記入下表：
　　序號
　　1
　　2
　　3
　　4
　　5
　　V(Fe 3+ )/mL
　　0.50
　　1.00
　　1.50
　　2.00
　　2.50
　　ρ (Fe 3+ )/ （μ g/mL ）
　　A
　　在坐標(biāo)紙上以鐵的質(zhì)量濃度ρ (Fe 3+ ) 為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線.
　　3.試樣中鐵含量的測定
　　移取 10.00mL 試樣溶液,按制作標(biāo)準(zhǔn)曲線相同的步驟顯色、定容后,在相同的波長下測定吸光度,由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出鐵的質(zhì)量濃度,然后再換算成原試樣中微量鐵的質(zhì)量濃度.
　　五、思考題
　　1 ．實驗中鹽酸羥胺和乙酸鈉的作用是什么?
　　2 ．根據(jù)自己的實驗結(jié)果,計算最大吸收波長下的摩爾吸光系數(shù).
　　3 ．朗伯比耳定律的物理意義是什么?什么叫吸收曲線,什么叫標(biāo)準(zhǔn)曲線?