首先懷疑,特異性不好,解決辦法：
1,可能是模板量過高,降低模板濃度10-1000倍；
2,適當(dāng)提高退火溫度1-3度,或者先用高于你以往退火溫度的1-3度先p上5個(gè)循環(huán),再用先前溫度p剩余的循環(huán)（也就是在程序中多設(shè)置2步）；
3,稍降Mg離子濃度,如果以前加1.5ul的,試試1-1.2ul；
如果以上方案還不能解決,就要檢查你的模板、引物和taq,重新提模板、重新稀釋引物,以及用新的pcr試劑.
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PCR結(jié)果沒有條帶,都是彌散的,這是為什么
PCR結(jié)果沒有條帶,都是彌散的,這是為什么
前幾次做的結(jié)果都挺好的,條帶很清楚,亮度也可以,就是不太齊,但是最近幾次幾乎沒有目的帶,都是彌散的,從頭到尾,我用的東西都是一樣的,條件也沒變,但是就是跑不出來,這是為什么?mark跑得很好,應(yīng)該不是電泳的問題,
前幾次做的結(jié)果都挺好的,條帶很清楚,亮度也可以,就是不太齊,但是最近幾次幾乎沒有目的帶,都是彌散的,從頭到尾,我用的東西都是一樣的,條件也沒變,但是就是跑不出來,這是為什么?mark跑得很好,應(yīng)該不是電泳的問題,
生物人氣：813 ℃時(shí)間：2020-10-01 07:15:41
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