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  • 為什么做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的PBS緩沖液不含鈣離子和鎂離子?

    為什么做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的PBS緩沖液不含鈣離子和鎂離子?
    在將培養(yǎng)皿中的細(xì)胞吹下之前,需要將培養(yǎng)液倒掉,然后用不含鈣離子和鎂離子的PBS洗,才能加Trypsin,為什么必須是不含金屬離子的PBS?原理是什么?而加了這兩種離子的PBS是什么作用?
    也就是說PBS都是不能加這兩種離子的是吧?
    麻煩還有個(gè)問題,三種細(xì)胞培養(yǎng)基IMDM、DMEM、1640有什么區(qū)別?
    生物人氣:263 ℃時(shí)間:2020-01-29 13:25:33
    優(yōu)質(zhì)解答
    因?yàn)椋篜BS中加入了Na2HPO4和0.24g KH2PO4,他們能與鈣離子和鎂離子,金屬離子結(jié)合生成沉淀,
    附:
    0.01M 磷酸鹽緩沖液(PBS)配制方法
    稱取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸餾水中,用HCl調(diào)節(jié)溶液的pH值至7.4,最后加蒸餾水定容至1L即可.在15lbf/in2(1034×105Pa)高壓下蒸氣滅菌(至少20分鐘),保存存于室溫或4℃冰箱中.
    需要注意的是,通常所說的濃度0.01M 指的是緩沖溶液中所有的磷酸根濃度,而非Na 離子或K 離子的濃度,Na 離子和K 離子只是用來調(diào)節(jié)滲透壓的.如果是用于免疫組化的話,則需要在配置的時(shí)候分別加入100 u/ml青霉素和鏈霉素之后再調(diào)PH、定容、滅菌消毒.
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