提取部分：
①剪：越細(xì)越好,盡量去除葉脈等部分.
②加藥品：二氧化硅、碳酸鈣和丙酮.前兩種是粉末狀藥品,各加少許,后者是有機(jī)溶劑,研磨時(shí)加約5ml.二氧化硅的作用是使研磨更加充分、迅速；碳酸鈣的作用是調(diào)節(jié)液體的pH,防止葉綠素被破壞保護(hù)葉綠素不分解；丙酮用來溶解提取葉綠體中的色素.
③磨：研磨要領(lǐng)是不能一下一下的砸,而是要用力的壓 .研磨要迅速、充分.這是因?yàn)橐皇且驗(yàn)楸菀讚]發(fā)；二是為了使葉綠體完全破裂,從而能提取較多的色素；三是葉綠素極不穩(wěn)定,能被活細(xì)胞中的葉綠素酶水解而破壞.
④過濾：將研磨液迅速倒入玻璃漏斗（漏斗基部放一塊單層尼龍布）中進(jìn)行過濾.將濾液收集到試管中,及時(shí)用棉塞將試管口塞嚴(yán).研磨液迅速倒入以及用棉塞是因?yàn)檠心ゼ拥谋苋菀讚]發(fā).單層尼龍布是為了過濾充分,因?yàn)槿~片的研磨有殘?jiān)?
分離部分：
1.制備濾紙條：將預(yù)備在試驗(yàn)桌上的濾紙條一端剪去兩個(gè)角使之呈梯形.呈梯形,根據(jù)小孔(邊緣)擴(kuò)散原理,物質(zhì)分子沿邊緣擴(kuò)散速度要大于里邊擴(kuò)散的速度,因此要將濾紙條的一端剪去兩角,主要是為了延長邊緣長度,這樣可以使色素在濾紙條上擴(kuò)散均勻,便于觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果.
2.畫濾液細(xì)線：細(xì),勻,直,濃.最好之前用鉛筆輕輕地畫一道線,放置色素帶重疊,用提取液反復(fù)劃好幾次,每次劃完盡量吹干,不要弄破紙條.用鉛筆可以劃得整齊,這樣讓每一種色素都有共同的起點(diǎn).鉛筆而不用鋼筆是不易擴(kuò)散.畫得越細(xì)越多次,就越濃,越好跑,分得開,越清楚
3.層析分離葉綠體中的色素：將紙條畫有濾液細(xì)線的一端置于燒杯中的層析液中,注意千萬不要將濾液細(xì)線浸沒在層析液中,因?yàn)樯匾兹芙庥趯游鲆褐?導(dǎo)致色素帶不清晰.層析液是揮發(fā)性較強(qiáng)的有機(jī)溶劑,并且具有一定的毒性,所以在操作中要盡量用培養(yǎng)皿蓋住燒杯口.
4.觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果：最后濾紙條上將分離出四條色素帶,顏色從上往下分別是橙黃色、黃色、藍(lán)綠色和黃綠色,四種色素分別是胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a和葉綠素b.
還有疑問嗎?
上面有畫濾液細(xì)線的作用：讓每一種色素都有共同的起點(diǎn).跑步也有線的啊.畫得越細(xì)越多次,就越濃,越好跑,分得開,越清楚.一定要細(xì)并且要直,這樣可以防止色素帶之間的重疊.畫線時(shí)一般要重復(fù)多次,使濾液細(xì)線上的色素多一些,分離后的色素帶更加清晰.但一次畫完后,必須待其干后再畫第二次,以確保濾液細(xì)線較細(xì).