瓊脂糖凝膠的配制
⑴瓊脂糖凝膠的制備：稱取0.3g瓊脂糖,置于三角瓶中,加入30ml TBE或TAE緩液,置于三角瓶中,加入30ml TBE或TAE緩液,置于三角瓶中,加入30ml TBE或TAE緩液,將該三角瓶置于微波爐加熱至瓊脂糖溶解.將冷卻至65℃左右的瓊脂糖凝膠液,加入溴化乙錠,充分混勻.
⑵膠板的制備：
①取有機(jī)玻璃內(nèi)槽,洗凈、晾干；
②將有機(jī)玻璃內(nèi)槽置于一水平位置模具上,安好擋板,放好梳子.吸取少量瓊脂糖溶液封固膠膜邊緣,任其凝固,在距離底板0.5～1.0mm的位置上放置梳子,以便加入瓊脂糖后可以形成完好的加樣孔.如果梳子距離玻璃板再近,則拔出梳子時孔底將有破裂的危險,破裂后將使樣品在凝膠與玻璃板之間滲漏.
③將剩余的溫?zé)岘傊侨芤旱谷肽z膜中,使膠液緩慢地展開,直到在整個有機(jī)玻璃板表面形成均勻的膠層.凝膠的厚度在3～5mm之間,檢查一下梳子的齒下或齒間是否有氣泡.
④室溫下靜置30min左右,待凝固完全后,輕輕拔出梳子,在膠板上即形成相互隔開的上樣孔.制好膠后將鋪膠的有機(jī)玻璃內(nèi)槽放在含有0.5～1×TAE（Tris-乙酸） 或TBE（Tris-硼酸）工作液的電泳槽中使用,沒過膠面1mm以上.
（注：溴化乙錠是一種強(qiáng)烈的誘變劑并有中度毒性.使用含有該染料的溶液時必須戴手套.使用完后應(yīng)該進(jìn)行凈化處理.通常用水配制成10mg／ml的貯存液在室溫下避光儲存,使用終濃度為0.5μg／ml.）