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  • 實驗做的RT-PCR,不知道問什么總是出不來結(jié)果,曲線雜亂無章.是什么原因呢?

    實驗做的RT-PCR,不知道問什么總是出不來結(jié)果,曲線雜亂無章.是什么原因呢?
    用的是探針法,引物、Taq酶和dNTP什么的都是沒問題的,只是FAM長期凍融什么的,是不是作用降低了呢,是不是這個原因呢?
    政治人氣:236 ℃時間:2020-05-31 18:54:39
    優(yōu)質(zhì)解答
    1 曲線的趨勢是什么 如果沒有任何章法,說明試驗不成功
    2 模板有沒有問題
    3 逆轉(zhuǎn)錄
    4 懷疑是熒光探針的問題你可以跑一下電泳看看恩,今天跑了電泳,沒有擴增成功,明天想換整套試劑從新做一遍。曲線在前三次試的時候是毫無章法的,但是到第四次的時候呈現(xiàn)出一定的上揚趨勢,但是熒光信號出現(xiàn)的比平常晚了六七個循環(huán)。模板應(yīng)該沒有問題的,不是逆轉(zhuǎn)錄,是直接拿來的質(zhì)粒進行擴增的。
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