反轉(zhuǎn)錄時(shí),是不是RNA越多越好?
反轉(zhuǎn)錄時(shí),是不是RNA越多越好?
今天我做了兩管反轉(zhuǎn)錄,RNA的模板量分別為4ul和8ul,想看看它們的區(qū)別.當(dāng)以一個(gè)管家基因的引物,以這兩管cDNA為模板擴(kuò)增時(shí),由于疏忽,把兩管弄混了.后悔萬(wàn)分.現(xiàn)在只知道這兩管PCR產(chǎn)物的電泳圖像,有些差別,但不知道哪個(gè)是哪個(gè),很郁悶,請(qǐng)高手解疑!
今天我做了兩管反轉(zhuǎn)錄,RNA的模板量分別為4ul和8ul,想看看它們的區(qū)別.當(dāng)以一個(gè)管家基因的引物,以這兩管cDNA為模板擴(kuò)增時(shí),由于疏忽,把兩管弄混了.后悔萬(wàn)分.現(xiàn)在只知道這兩管PCR產(chǎn)物的電泳圖像,有些差別,但不知道哪個(gè)是哪個(gè),很郁悶,請(qǐng)高手解疑!
生物人氣：713 ℃時(shí)間：2020-05-03 15:47:50
優(yōu)質(zhì)解答
博凌科為-為你在RT-PCR說(shuō)明書上一般會(huì)表明使用的RNA量的范圍,在這范圍內(nèi)模板量越多,得到的cDNA量越多,如果取1ul做模板,差別不大,你可以嘗試將cDNA進(jìn)行稀釋,在用看家基因的引物進(jìn)行PCR,這樣就可以通過(guò)電泳條帶的明暗來(lái)判斷之前使用的RNA的模板量.
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