一、實驗所需的儀器設(shè)備和用具.
二、實驗安排與要求：將全班若干小組（6-7人）,每小組配制500 mlMS固體培養(yǎng)基,
三、邊示范邊講解實驗方法和步驟
1、計算并填寫培養(yǎng)基成分單
計算公式：∨母液＝∨配制÷母液倍數(shù)
∨激素＝∨配制×培養(yǎng)基中所要求的激素濃度÷激素母液濃度
2.每組取500ml的燒杯一只,加300ml蒸餾水,用天平稱4g瓊脂放入蒸餾水中,在電爐上加熱溶解.稱15g蔗糖放入溶解的瓊脂中.
3.按配方取出各種母液,放入到溶解后的瓊脂和蔗糖溶液中,用玻璃棒攪動混合,并加蒸餾水定容至500ml.
4.用1mol/L的NaOH或1mol/LHCL將PH值調(diào)至5.8,可用PH精密試紙或酸度計測定.
5.用培養(yǎng)基分裝用具將500ml的培養(yǎng)基分注于15個所選用的培養(yǎng)瓶中.
6.用封口膜、棉塞或其它封口物包扎瓶口,并做好標(biāo)記.
7.把分裝好的培養(yǎng)基及所需滅菌的各種用具、蒸餾水等,放入高壓滅菌鍋的消毒桶內(nèi),將外層鍋內(nèi)加水至水位線.蓋好鍋蓋,上好螺絲,接通電源升溫.待鍋內(nèi)溫度達100.C（0.05kgf/cm2或0.005MPa）左右時,打開排氣閥排凈鍋內(nèi)冷空氣,然后關(guān)閉排氣閥,繼續(xù)加熱至溫度達到121.C（1.05kgf/cm2或0.103MPa）時,維持20~30min即可切斷電源,讓鍋內(nèi)氣壓自然下降,當(dāng)壓力降到零點后,打開排氣閥,排出剩余蒸汽,再打開鍋蓋取出培養(yǎng)基及滅菌物品.
8.培養(yǎng)基及滅菌物品在室溫下自然冷卻后,存放于陰涼干燥潔凈處待用.
四、總結(jié)高壓蒸汽滅菌的原理和一般操作步驟實驗