做RT-PCR設(shè)計(jì)引物時(shí),找引物序列有哪些好方法?
做RT-PCR設(shè)計(jì)引物時(shí),找引物序列有哪些好方法?
其他人氣：678 ℃時(shí)間：2020-04-06 19:14:39
優(yōu)質(zhì)解答
我也做得RT-PCR,是提取某物種中未測(cè)序的一段基因.是用近緣物種基因進(jìn)行比對(duì),得到保守序列設(shè)計(jì)引物,再提取總RNA,RT-PCR得到目的基因的片段我需要檢測(cè)的分子，在nucleotide里找不到它的序列，不知道要怎么辦，有沒(méi)有好的建議給呢？用幾種近緣物種的比對(duì)呀，找保守區(qū)設(shè)計(jì)簡(jiǎn)并引物，RT-PCR獲得部分片段后測(cè)序，根據(jù)測(cè)得的序列設(shè)計(jì)特異引物，再用RACE法分別向兩端延伸，得到的兩段序列拼接就可以得到全序列了 我做的物種的那段基因數(shù)據(jù)庫(kù)也沒(méi)有，就是找近緣物種來(lái)設(shè)計(jì)引物的，目前已經(jīng)得到結(jié)果了。
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