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  • 怎么判斷實時熒光定量PCR標準曲線是否準確

    怎么判斷實時熒光定量PCR標準曲線是否準確
    其他人氣:765 ℃時間:2020-03-27 15:15:21
    優(yōu)質(zhì)解答
    看標準曲線是否反映出了標準物質(zhì)的真實濃度那請問標準曲線中的R2代表什么意思?為什么說R2>0.99可信度就高?R2決定系數(shù),英文(coefficient of determination),有的教材上翻譯為,判定系數(shù),決定系數(shù)的大小決定了相關的密切程度。當R2越接近1時,表示相關的方程式參考價值越高;相反,越接近0時,表示參考價值越低。你做了標準曲線就會歸納出一個方程式來,這個方程式的價值高低由決定系數(shù)判定。謝謝你的解答,但我還有一個疑問,是不是說如果算出E接近0.99,同時R2>0.99,這樣的定量結果可信度更高呢?首先要解決的問題是你做這個標準曲線用的標本濃度是已知的(比如1*104、1*103、1*102、10copies/ml),然后你做出了橫坐標是拷貝數(shù),縱坐標是CT值的一個直線方程,只有這樣當你擴增出一個標本的CT值時,帶入方程你才能得出這個標本的拷貝數(shù),(這才有意義,可能這些話是多余的,但是很多人做標準曲線時最基本的條件——繪制標準曲線的標本濃度不是個定值,)這時Rsq接近0.99,Eff(擴增效率)也最理想,定量結果可信度高。
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