基本常識(shí)
PCR包括7種基本成分:模板DNA、特異性引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶、脫氧核苷三磷酸(dNTP)、二價(jià)陽(yáng)離子、緩沖液及一價(jià)陽(yáng)離子.
其中緩沖液:一般使用Tris-Cl緩沖液,標(biāo)準(zhǔn)的為10mmol/L,并將其調(diào)節(jié)到8.8.8之間
配制方法(二種):
0.1mol/L Tris-Cl(1000mL)
Tris堿 12.11g;ddH2O 800mL;HCl 49mL
三者混勻充分溶解后,滴加濃鹽酸調(diào)pH至8.0,定溶至1000mL
0.01mol/L Tris-Cl(1000mL)
Tris堿 1.211g;ddH2O 800mL;HCl 49mL
三者混勻充分溶解后,滴加濃鹽酸調(diào)pH至8.0,定溶至1000mL
各成分作用:
Tris 本身是一級(jí)胺,其 pKa 為 8 因此在 pH 7.8.5 有良好的緩沖能力
CL- 有一定的弱酸性
pcr緩沖液中各成分的作用是什么?
pcr緩沖液中各成分的作用是什么?
是緩沖液中各成分的作用,不是緩沖液的作用,
是緩沖液中各成分的作用,不是緩沖液的作用,
生物人氣:439 ℃時(shí)間:2020-04-30 08:28:22
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