大多數(shù)真核細胞mRNA的3’端通常具有由20-30個腺苷酸組成的polyA尾巴,寡聚胸腺嘧啶脫氧核糖核苷（OligoT）可以與之配對結(jié)合,這就是提取mRNA最基本的原理.具體到實驗手段上,現(xiàn)在磁珠法、纖維素柱層析法都有在用.
磁珠法一般是用生物素標記OligoT,親和素標記磁珠（生物素和親和素間具有高度親和力）.實驗時生物素標記的OligoT與mRNA的polyA高效雜交形成復合體,此復合體又與標有親和素的磁珠結(jié)合.用磁性分離架就可以將這堆復合物分離出來.最后用無RNase去離子水將mRNA從復合物中洗脫下來即可.
寡聚dT纖維素柱層析法的大致流程：總RNA流經(jīng)寡聚dT纖維素柱時,在高鹽緩沖液中,帶polyA尾的mRNA被特異地結(jié)合在柱上.降低鹽濃度,mRNA被洗脫.一般過兩次柱后,就可得到較高純度的mRNA.
當然有些mRNA沒有polyA尾巴,這種就比較難辦了,我最近的實驗就是在對付這種東西.如果你是拿mRNA做RT-PCR,其實一般是不必分離mRNA的,設(shè)計好引物就可以用總RNA做了.