用Trizol法提DNA遇到的問題求教
用Trizol法提DNA遇到的問題求教
生物人氣:776 ℃時間:2020-08-26 08:06:00
優(yōu)質(zhì)解答
Trizol是用來提取RNA的,因為pH低,所以DNA都是溶解在酚相的,你可以用pH8.0的Tris平衡酚來提取DNA你好,首先非常感謝你的回答,我的一般步驟是這樣的,加完trizol之后,氯仿離心后,棄水樣,然后加無水乙醇,再離心,棄上清,再用檸檬酸鹽洗兩遍,然后用75%的乙醇洗一遍,晾干,但是我現(xiàn)在濃度很低,只有幾十ng/ul而且260/280也不太好,純度不太高,所以我想問下你的方法能具體說下嗎?跟你的差不多,樣品放在Tris平衡酚中,加氯仿,離心,棄酚相,把上清水相吸到新的管子中,DNA在水相中,蛋白什么的在酚水相之間的分界中,乙醇沉淀的時候加入一些醋酸鈉助沉,沉淀直接用75%的乙醇洗一遍,晾干,溶解先謝謝哈,我還想問下那你有測過它們的濃度和純度么?產(chǎn)量如何呢?乙醇沉淀時能看到像提RNA時的一些白色沉淀么?還有你有將這個溶液做成粉末的經(jīng)驗么?因為得送出去,液體的不太好保存呢。。。產(chǎn)量和濃度測過,看你提什么東西的DNA了,如果你有條件,可以買個kit用,非要手抽的話,你直接用凍干儀凍干就行了
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