紙層析法（paper chromatography）是生物化學上分離、鑒定氨基酸混合物的常用技術(shù),可用于蛋白質(zhì)的氨基酸成分的定性鑒定和定量測定.紙層析法是用濾紙作為惰性支持物的分配層析法,其中濾紙纖維素上吸附的水是固定相,展層用的有機溶溶劑是流動相.在層析時,將樣品點在距濾紙一端約2～3cm的某一處,該點稱為原點；然后在密閉容器中層析溶劑沿濾紙的一個方向進行展層,這樣混合氨基酸在兩相中不斷分配,由于分配系數(shù)（Kd）不同,結(jié)果它們分布在濾紙的不同位置上.物質(zhì)被分離后在紙層析圖譜上的位置可用比移值（rate of flow,Rf）來表示.所謂Rf,是指在紙層析中,從原點至氨基酸停留點（又稱為層析點）中心的距離（X）與原點至溶劑前沿的距離（Y）的比值：
在一定條件下某種物質(zhì)的Rf值是常數(shù).Rf值的大小與物質(zhì)的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)、溶劑系統(tǒng)、溫度、濕度、層析濾紙的型號和質(zhì)量等因素有關(guān).
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