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  • PCR反應(yīng)原理中引物是什么,從哪里來(lái),有什么作用

    PCR反應(yīng)原理中引物是什么,從哪里來(lái),有什么作用
    其他人氣:654 ℃時(shí)間:2020-06-14 00:01:05
    優(yōu)質(zhì)解答
    引物是一段短的單鏈RNA或DNA片段,可結(jié)合在核酸鏈上與之互補(bǔ)的區(qū)域,其功能是作為核苷酸聚合作用的起始點(diǎn),核酸聚合酶可由其3′端開始合成新的核酸鏈.體外人工設(shè)計(jì)的引物被廣泛用于聚合酶鏈反應(yīng)、測(cè)序和探針合成等.
    引物是人工合成的兩段寡核苷酸序列,一個(gè)引物與感興趣區(qū)域一端的一條DNA模板鏈互補(bǔ),另一個(gè)引物與感興趣區(qū)域另一端的另一條DNA模板鏈互補(bǔ).
    在PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)中,已知一段目的基因的核苷酸序列,根據(jù)這一序列合成引物,利用PCR擴(kuò)增技術(shù),目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈,引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合,然后在DNA聚合酶作用下進(jìn)行延伸,如此重復(fù)循環(huán),延伸后得到的產(chǎn)物同樣可以和引物結(jié)合.  PCR引物設(shè)計(jì)的目的是找到一對(duì)合適的核苷酸片段,使其能有效地?cái)U(kuò)增模板DNA序列.如前述,引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否.對(duì)引物的設(shè)計(jì)不可能有一種包羅萬(wàn)象的規(guī)則確保PCR的成功,但遵循某些原則,則有助于引物的設(shè)計(jì).
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