想請教一個PCR基本問題.PCR時,目標(biāo)基因的核苷酸序列是未知的,那我們設(shè)計引物是根據(jù)其近緣種的基因設(shè)計
想請教一個PCR基本問題.PCR時,目標(biāo)基因的核苷酸序列是未知的,那我們設(shè)計引物是根據(jù)其近緣種的基因設(shè)計
PCR時,目標(biāo)基因的核苷酸序列是未知的,那我們設(shè)計引物是根據(jù)其近緣種的基因設(shè)計嗎?
我分離得到一個蛋白,想進(jìn)行表達(dá),首先要獲得其全長基因.提取RNA,要進(jìn)行一步法RT-PCR,這時需要基因特異性引物,是不是在gene bank 里由其近緣種的保守序列進(jìn)行設(shè)計?這樣獲得的是目的蛋白的全長基因嗎?
PCR時,目標(biāo)基因的核苷酸序列是未知的,那我們設(shè)計引物是根據(jù)其近緣種的基因設(shè)計嗎?
我分離得到一個蛋白,想進(jìn)行表達(dá),首先要獲得其全長基因.提取RNA,要進(jìn)行一步法RT-PCR,這時需要基因特異性引物,是不是在gene bank 里由其近緣種的保守序列進(jìn)行設(shè)計?這樣獲得的是目的蛋白的全長基因嗎?
生物人氣：732 ℃時間：2020-04-12 20:34:34
優(yōu)質(zhì)解答
可以根據(jù)其其近緣種的保守基因序列設(shè)計,但通常都很難得到全長.要得到基因全長,可先得到中間片段序列,然后RACE或者Inverse PCR都可以嘗試下.如果近緣種序列同源性很高,還可以參考其他物種序列,設(shè)計幾對引物,直接擴(kuò)增基因全長.
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