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  • 如何擴(kuò)增及提取表達(dá)載體?是不是導(dǎo)入感受態(tài)細(xì)胞培養(yǎng),然后直接提取質(zhì)粒就可以?怎么確是我的表達(dá)載體質(zhì)粒

    如何擴(kuò)增及提取表達(dá)載體?是不是導(dǎo)入感受態(tài)細(xì)胞培養(yǎng),然后直接提取質(zhì)粒就可以?怎么確是我的表達(dá)載體質(zhì)粒
    如何擴(kuò)增及提取表達(dá)載體?是不是導(dǎo)入感受態(tài)細(xì)胞培養(yǎng),然后直接提取質(zhì)粒就可以?怎么確提取的質(zhì)粒是我的表達(dá)載體質(zhì)粒
    其他人氣:540 ℃時(shí)間:2020-07-22 08:37:36
    優(yōu)質(zhì)解答
    不對(duì),通過(guò)轉(zhuǎn)化到感受態(tài)細(xì)菌中,不是細(xì)胞.感受態(tài)的大腸桿菌,可以自己制作也可以通過(guò)購(gòu)買(mǎi).之后將細(xì)菌凃到含有抗生素的板子上,長(zhǎng)出克隆后挑取單克隆,將單克隆加入含有抗生素的細(xì)菌培養(yǎng)基中培養(yǎng),之后提取質(zhì)粒,提取質(zhì)粒可以購(gòu)買(mǎi)相應(yīng)的試劑盒,按照試劑盒的說(shuō)明書(shū)操作即可.質(zhì)粒是帶有抗性基因的,只有含有該質(zhì)粒的細(xì)菌才能在含有對(duì)應(yīng)抗生素的培養(yǎng)基中存活并增殖,這樣就能確保是你的表達(dá)載體質(zhì)粒.當(dāng)然為了防止雜菌的污染,整個(gè)過(guò)程中最好是無(wú)菌操作.而表達(dá)載體質(zhì)粒有可能出現(xiàn)突變等情況,所以可以在提出質(zhì)粒之后,取少量質(zhì)粒送測(cè)序,來(lái)確保序列的無(wú)誤.
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