紙色譜法是屬于分配色譜的一種,通常用特制的濾紙如新華一號(hào)濾紙作為固定相（水的支持劑）,含有一定比例的水的有機(jī)溶劑（展開(kāi)相）作流動(dòng)相,應(yīng)用于多官能團(tuán)或高極性化合物如糖或氨基酸的分離、鑒定.
Rf比移值是一個(gè)特定常數(shù).Rf值隨被分離化合物的結(jié)構(gòu)、固定相與流動(dòng)相的性質(zhì)、溫度等因素不同而異.當(dāng)溫度、濾紙等實(shí)驗(yàn)條件固定時(shí),它是一個(gè)常數(shù).這也就是用紙色譜進(jìn)行定性分析的依據(jù).
用標(biāo)準(zhǔn)氨基酸作出紙色譜和Rf值,與在相同條件下作出的混合物的紙色譜和Rf相對(duì)照,以達(dá)到分離、鑒定氨基酸的目的.當(dāng)然,在實(shí)際應(yīng)用中,紙上層析的操作要復(fù)雜得多.尤其是Rf值相接近的氨基酸需要用兩向紙上層析才能達(dá)到分離鑒定的目的.
氨基酸經(jīng)紙上層析后,常用茚三酮顯色劑顯色.必須注意!指印含有一定量的氨基酸,在實(shí)驗(yàn)方法中足以檢出（可以檢出以微克計(jì)的痕跡量）.