雙縮脲法的原理雙縮脲(NH2-CO-NH-CO-NH2)在堿性溶液中可與銅離子產(chǎn)生紫紅色的絡(luò)合物,這一反應(yīng)稱為雙縮脲反應(yīng).因?yàn)榈鞍踪|(zhì)中有多個(gè)肽鍵,也能與銅離子發(fā)生雙縮脲反應(yīng),且顏色深淺與蛋白質(zhì)的含量的關(guān)系在一定范圍內(nèi)符合比爾定律,而與蛋白質(zhì)的氨基酸組成及分子量無關(guān),所以可用雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)的含量.
雙縮脲反應(yīng)主要涉及肽鍵,因此受蛋白質(zhì)特異性影響較小.且使用試劑價(jià)廉易得,操作簡(jiǎn)便,可測(cè)定的范圍為1～10Mg蛋白質(zhì),適于精度要求不太高的蛋白質(zhì)含量的測(cè)定,能測(cè)出的蛋白質(zhì)含量須在約05Mg以上.雙縮脲法的缺點(diǎn)是靈敏度差、所需樣品量大.干擾此測(cè)定的物質(zhì)包括在性質(zhì)上是氨基酸或肽的緩沖液,如TrIs緩沖液,因?yàn)樗鼈儺a(chǎn)生陽性呈色反應(yīng),銅離子也容易被還原,有時(shí)出現(xiàn)紅色沉淀
你所說的不能是指什么?能不能補(bǔ)充一下
你還是沒說清楚.什么叫答案不能用雙縮脲鑒定蛋白質(zhì)或多肽的存在?
是限制不允許使用雙縮脲來鑒定蛋白質(zhì)或多肽還是說用雙縮脲無法鑒定出是否有蛋白質(zhì)或多肽?如果可以和我在線說下.我想能盡量完善答案
如果說是雙縮脲鑒定后無法肯定是否有蛋白質(zhì)或多肽,那你應(yīng)該詳細(xì)的看我上面說的,雙縮脲法的缺點(diǎn)就是靈敏度差、所需的樣品量大,而且干擾測(cè)定的物質(zhì)包括在性質(zhì)上是氨基酸或肽的緩沖液,雙縮脲鑒定的主要是蛋白質(zhì)或多肽中的肽鍵.