pcr退火溫度太高有什么缺點(diǎn)
pcr退火溫度太高有什么缺點(diǎn)
pcr的引物如果很長(zhǎng),導(dǎo)致tm值很高,這樣擴(kuò)增的退火溫度就會(huì)很高,如達(dá)到65-70℃,會(huì)不會(huì)導(dǎo)致模板正反鏈的復(fù)性,從而導(dǎo)致擴(kuò)增效率降低?
pcr的引物如果很長(zhǎng),導(dǎo)致tm值很高,這樣擴(kuò)增的退火溫度就會(huì)很高,如達(dá)到65-70℃,會(huì)不會(huì)導(dǎo)致模板正反鏈的復(fù)性,從而導(dǎo)致擴(kuò)增效率降低?
數(shù)學(xué)人氣:703 ℃時(shí)間:2020-02-06 01:50:20
優(yōu)質(zhì)解答
說(shuō)影響得看情況,退火溫度太高肯定會(huì)影響引物的結(jié)合效率的.但是,實(shí)際上,好的引物一般是上下游引物的退火溫度比較接近.有時(shí)候,我們可能會(huì)通過(guò)犧牲特異性的手段(當(dāng)GC含量過(guò)高時(shí),減少引物長(zhǎng)度)來(lái)平衡兩條引物的退火溫...
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