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  • 什么是蛋白質(zhì)測定的Lowry法?

    什么是蛋白質(zhì)測定的Lowry法?
    其他人氣:208 ℃時間:2020-04-18 15:53:59
    優(yōu)質(zhì)解答
    就是Folin---酚法測定蛋白質(zhì)含量
    原理:磷鉬酸和磷鎢酸在堿性條件下,易被酚類化合物還原而呈藍(lán)色反應(yīng).蛋白質(zhì)中含有代酚基的酪氨酸,故有此反應(yīng).Folin---酚法的靈敏度是雙縮脲法的100倍.
    試劑:一:1,4%碳酸鈉;2,0.2N氫氧化鈉;3,1%硫酸銅;4,2%酒石酸鉀鈉.1和2等體積混合,3和4等體積混合,然后將兩液以50:1混合(甲).當(dāng)天使用.二:1NFolin--酚試劑(乙).
    方法:標(biāo)準(zhǔn)曲線;試管中加0、0.2、0.40、0.60、1.00毫升酪蛋白溶液(500微克/毫升),加水補足1毫升,平行做兩份.按序各加5毫升試劑(甲),搖勻,室溫置放10分鐘,再依次加入1N(0.5毫升)Folin----酚試劑(乙),搖勻,30攝氏度保溫30分鐘.然后在分光光度機上比色測定(A500).待測樣品如上反應(yīng)和測定,對照標(biāo)準(zhǔn)曲線,得出含量.
    注意:酚和檸檬酸對測定有干擾,低濃度尿素,胍,硫酸鈉,硝酸鈉,三氯乙烯,乙醇,乙醚,丙酮對顯色無影響.
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