完全可以,PCR長度從50bp到數(shù)百都可以,不止局限于150-300個堿基對.樓上說的有道理,但是有一點要注意,最好計算一下擴增片段的Tm值,這樣做溶解曲線的時候,光有一個峰還不夠,而且得到的TM和你計算的Tm相吻合才行.
是否在翻譯區(qū)沒有影響.
熒光定量PCR引物設計
熒光定量PCR引物設計
本人在做熒光定量PCR之前,先用Primer 3.0設計了目的基因的引物,用于半定量PCR,而且也把引物放入NCBI中進行了blast比對,得到引物為特異性引物,半定量PCR效果也跟預期一樣,電泳僅出現(xiàn)目的帶,接著我準備用sybr green 做熒光定量PCR,不知道可不可以就用我現(xiàn)在設計的這個引物去做?因為目的基因是多基因家族,所以在設計引物時我是在3非翻譯區(qū)設計的引物,不知道熒光定量PCR中,此引物還可不可以用?
本人在做熒光定量PCR之前,先用Primer 3.0設計了目的基因的引物,用于半定量PCR,而且也把引物放入NCBI中進行了blast比對,得到引物為特異性引物,半定量PCR效果也跟預期一樣,電泳僅出現(xiàn)目的帶,接著我準備用sybr green 做熒光定量PCR,不知道可不可以就用我現(xiàn)在設計的這個引物去做?因為目的基因是多基因家族,所以在設計引物時我是在3非翻譯區(qū)設計的引物,不知道熒光定量PCR中,此引物還可不可以用?
生物人氣：797 ℃時間：2020-02-05 09:42:13
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