PCR熔解曲線分析法是做realtime-pcr時分析,用來確定不同的反應(yīng)產(chǎn)物,包括非特異性產(chǎn)物的分析方法.原理是在擴增反應(yīng)完成后,通過逐漸增加溫度的同時監(jiān)測每一步的熒光信號來產(chǎn)生溶解曲線,隨著反應(yīng)中雙鏈DNA變性,熒光染料又回復(fù)到游離狀態(tài)導(dǎo)致熒光信號降低,用熒光信號改變的負的一次導(dǎo)數(shù)與溫度作圖,在擴增產(chǎn)物的溶解溫度上有一特征峰（Tm,DNA雙鏈解鏈50％的溫度）,因為它們在不同的溫度溶解,所以用這個特征峰就可以將特異產(chǎn)物與其它產(chǎn)物如引物二聚體區(qū)分開.
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