A、首先要進(jìn)行培養(yǎng)基的制備、用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板，A正確；
B、然后進(jìn)行對(duì)土壤稀釋液進(jìn)行涂布于各組平板上，B正確；
C、將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，37℃恒溫培養(yǎng)24～48小時(shí)，C正確；
D、確定對(duì)照組無菌后，選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，求起平均值，再通過計(jì)算得出土壤中細(xì)菌總數(shù)，D錯(cuò)誤．
故選：D．