在液-固吸附色譜,液-液分配色譜這兩種液相色譜中才涉及到正相色譜及反相色譜.液-固吸附色譜（固定相是固體吸附劑,它是根據(jù)物質(zhì)在固定相是吸附作用差異來分離的.吸附作用越強(qiáng),K值越大,保留時(shí)間越長）液-液分配色譜（是將固定液涂在擔(dān)體上作為固定相的,它的分離原理與液液萃取的原理相同,從而服從分配定律.在固定液中溶解度大,K值大,保留時(shí)間長）.
正相色譜是指流動(dòng)相的極性小于固定相的極性；反正色譜是指流動(dòng)相的極性大于固定相的極性.
對(duì)于反相色譜,極性越小的物質(zhì),流動(dòng)相的極性越大,保留時(shí)間越長.極性越小的物質(zhì),流動(dòng)相的極性越小,保留時(shí)間越短.對(duì)于極性大的物質(zhì)來說,流動(dòng)相的極性對(duì)其保留時(shí)間影響較小.而正相色譜正好相反.
因此在應(yīng)用上正相色譜用于分離極性較大的物質(zhì),如蛋白質(zhì)、生物堿等.反相色譜多用于分離極性較小的物質(zhì),在流動(dòng)相的選擇上,反相色譜的優(yōu)勢(shì)更大,在實(shí)際工作中反相色譜的應(yīng)用更為廣泛