正相鍵合相色譜法
　　1.氰基與氨基化學(xué)鍵合相
　　是正相鍵合色譜法較常用的固定相.流動(dòng)相與以硅膠為固定相的吸附色譜法的流動(dòng)相相似,也是烷烴（常用正已烷等）加適量極性調(diào)整劑而構(gòu)成.氰基鍵合相的分離選擇性與硅膠相似,但極性小于硅膠,即用相同的流動(dòng)相及其它條件相同時(shí),同一組分的保留時(shí)間將小于硅膠.許多需用硅膠柱分離的課題,可用氰基鍵合相柱完成.氨基鍵合相與硅膠的性質(zhì)有較大差異,前者為堿性；后者為酸性.在作正相洗脫時(shí),表現(xiàn)出不同的選擇性.氨基鍵合相色譜柱是分析糖類最重要的色譜柱,也稱為碳水化合物柱.
　　2.分離機(jī)制
　　主要靠范德華作用力的定向作用力、誘導(dǎo)作用力或氫鍵作用力.例如,用氨基鍵合相分離極性化合物時(shí),主要靠被分離組分的分子與鍵合相的氫鍵作用力的強(qiáng)弱差別而分離,如對(duì)糖類的分離等.若分離含有芳環(huán)等可誘導(dǎo)極化的非極性樣品,則鍵合相與組分分子間的作用力,主要是誘導(dǎo)作用力.
　　3.流動(dòng)性的極性與容量因子的關(guān)系
　　在作正相洗脫時(shí),流動(dòng)相的極性增大,洗脫能力增加,K減小,t減??；反之k與t增大.分離結(jié)構(gòu)相近的組分時(shí),極性大的組分后出柱.
　　反相鍵合相色譜法
　　典型的反相鍵合色譜法是用非極性固定相和極性流動(dòng)相組成的色譜體系.固定相,常用十八烷基（ODS或C）鍵合相；流動(dòng)相常用甲醇-水或乙腈-水.非典型反相色譜系統(tǒng),用弱極性或中等極性的鍵合相和極性大于固定相的流動(dòng)相組成.
　　(1) 分離機(jī)制 反相鍵合相表面具有非極性烷基官能團(tuán),及未被取代的硅醇基.硅醇基具有吸附性能,剩余硅醇基的多寡,視覆蓋率而定.簡(jiǎn)要介紹疏溶劑理論.
　　疏溶劑理論：當(dāng)一個(gè)非極性溶質(zhì)或溶質(zhì)分子中的非極性部分與極性溶劑相接觸時(shí),相互產(chǎn)生斥力,自由能（G）增加,熵減小,不穩(wěn)定性增加.根據(jù)熱力學(xué)第二定律,系統(tǒng)由不穩(wěn)定到穩(wěn)定是自發(fā)的,即熵增加是自發(fā)的.因此,為了彌補(bǔ)熵的損失,溶質(zhì)分子中非極性部分結(jié)構(gòu)的取向,將導(dǎo)致在極性溶劑中形成一個(gè)“容腔”,這種效應(yīng)稱為疏溶劑或疏水效應(yīng).該理論認(rèn)為,在鍵合相反相色譜法中溶質(zhì)的保留主要不是由于溶質(zhì)分子與鍵合相間的色散力,而是溶質(zhì)分子與極性溶劑分子間的排斥力,促使溶質(zhì)分子與鍵合相的烴基發(fā)生疏水締合,且締合反應(yīng)是可逆的.容量因子k與自由能變化△G的關(guān)系如下式：
　　lnk＝lnV/V－△G/RT (8·5)
　　上式中的R為理想氣體常數(shù)、T為熱力學(xué)溫度、V是色譜柱中鍵合相表面所鍵合的官能團(tuán)的體積,V是色譜柱中流動(dòng)相的體積.該式說(shuō)明△G越大,被分離組分的k越小,保留時(shí)間越短.
　　(2)★★流動(dòng)相的極性與容量因子的關(guān)系 流動(dòng)相的極性增大,洗脫能力降低,溶質(zhì)的k增大,t增大；反之,k與t減小.分離結(jié)構(gòu)相近的組分時(shí),極性大的組分先出柱.
　　(3) 特點(diǎn) 反相色譜法是應(yīng)用最廣的色譜法,主要用于分離非極性至中等極性的各類分子型化合物,因?yàn)殒I合相表面的官能團(tuán)不流失,溶劑的極性可以在很大范圍內(nèi)調(diào)整,因此應(yīng)用范圍很寬.由它派生的反相離子對(duì)色譜法與離子抑制色譜法,可以分離有機(jī)酸、堿、鹽等離子型化合物.用反相液相色譜法,可以解決80%左右的液相色譜課題.因此,必須給予反相色譜法足夠的重視.對(duì)于結(jié)構(gòu)異構(gòu)體等難分離物質(zhì)的分離,則應(yīng)選用吸附色譜法.