色譜柱的安裝：
1、首先應(yīng)確認柱和儀器的接頭以及管路是否匹配.為減少死體積,進樣閥、柱子、檢測器之間的連接管路內(nèi)徑盡可能使用內(nèi)徑較小的管線,同時控制進樣器、色譜柱和檢測器之間連接管線的長度.安裝色譜柱之前,確認流路系統(tǒng)中的溶劑是否正常.對分析較復(fù)雜的樣品建議安裝保護柱.
2、為了使色譜柱與儀器系統(tǒng)達最佳的連接效果,應(yīng)盡量使用與色譜柱接口相匹配的螺帽和錐形接頭,如原來的接頭長期匹配其他類型的色譜柱,建議在連接新色譜柱前應(yīng)檢查匹配情況,避免造成色譜柱的損壞或因色譜柱不匹配造成的漏液.
3、使用PEEK 材料的通用接頭,只需用手擰緊不需要特定扳手,使用壓力為5000psi；使用溫度不得超過100℃.
流動相平衡：
1、在進行樣品檢測前,至少使用20倍柱體積流動相使色譜柱充分平衡.流動相一定要使用色譜級別的溶劑.如使用水相的緩沖液應(yīng)當天配制以保持新鮮避免細菌產(chǎn)生.
2、流動相使用前需用微孔濾膜過濾,消除流動相中顆粒對色譜系統(tǒng)和色譜柱的損壞.緩沖液與其他流動相混合后應(yīng)重新過濾避免溶解度變化造成產(chǎn)生新的沉淀.不應(yīng)使用純水作為流動相沖洗C18色譜柱,以免柱性能損壞（添加5％的有機溶劑沖洗色譜柱,同時可以達到對緩沖鹽清洗的作用.還可以使色譜柱更容易平衡）.
3、流動相需脫氣后使用,可避免因氣泡導(dǎo)致的泵和檢測器的工作不正常.如果測試時使用的流動相與色譜柱保存使用的流動相有較大區(qū)別,應(yīng)該使用過度分布的形式進行平衡.避免由于流動相的突然變化造成柱壓增加過大或流動相緩沖鹽結(jié)晶造成對色譜柱和儀器系統(tǒng)的損壞.正相色譜柱比反相色譜柱需要更長的平衡時間.
樣品制備與操作：
1、樣品應(yīng)當盡可能溶解在能與流動相相互溶的溶劑中.除特殊指明外,如使用強溶劑溶解樣品柱子的分辨率將可能降低.
2、樣品溶液在進樣前應(yīng)使用針頭式過濾器對樣品預(yù)先過濾.頻繁改變流動相組成,會加速降低柱效.
3、色譜柱由高壓勻漿法裝填,能承受較高壓力.為獲得最佳分離效果,使用時請不要超過200kgf,而且避免壓力突然上升或變化,否則會造成硅膠填料的破壞,減少色譜柱的使用壽命.除特殊要求外最高操作溫度不要超過60℃.
保存色譜柱：
1、如果流動相含有酸或無機鹽,應(yīng)當先用去離子水（20倍柱體積）沖洗干凈.然后用用100％乙腈或甲醇保存色譜柱.最后用柱子的接頭密封,并放在穩(wěn)定的環(huán)境中存放.
2、應(yīng)避免色譜柱受到直接的機械沖擊或摔落,避免造成色譜柱性能的降低.
色譜柱的再生：
1、用相當于20倍柱體積的溶劑按下列順序沖洗柱子,建議按柱子的箭頭方向沖洗,盡可能不反沖：沖洗時使用的的參考溶劑順序是水、甲醇、氯仿、異丙醇、甲醇.