說明書上應(yīng)該寫得很清楚.
一般買來分裝的PCR酶和BUFFER,如果用的次數(shù)不多,可以當(dāng)時用,當(dāng)時混合；
如果經(jīng)常使用,可以在使用前,先將BUFFER混合起來,即將鎂離子、dNTP等混合起來,酶除外.酶當(dāng)場加會比較好,可以將酶分裝,減少凍融次數(shù).
最后,還是提醒一下,以說明書使用方法為準(zhǔn)~買來的時候里面有酶 、BUFFER 和Mg離子三管，說明書上沒說怎么配，Buffeer和Mg離子都是滿管酶的話，肯定會寫每次用多少U，你自己算算BUFFER上的應(yīng)該也會寫是多少×的，N×就稀釋N倍鎂離子肯定有初始濃度，參照說明書上的終濃度，自己計算稀釋，如果說明書上沒寫，一般終濃度以20mM效果最好