可以鑒定出兩種狀態(tài)下細胞總RNA樣品內(nèi)A基因量的差異,但這個差異包含著誤差：
1,總RNA量的不準確性,雖然用分光光度計計算了濃度,但實際上還是有誤差的存在,對那些表達水平只差那么丁點兒的樣品尤其關(guān)鍵；
2,細胞整體表達水平會在不同情況下有差異,比如說高氧狀態(tài)下細胞分裂速度更快,此時細胞內(nèi)絕大多數(shù)基因表達水平都上調(diào)了,那此時A基因的增加就包括了整體水平的增加量和氧特異性誘導產(chǎn)生的增加量.
所以,我們需要找個能夠表現(xiàn)細胞整體表達狀態(tài)的基因作為參照,用來扣除第2種誤差,同時,該參照也可以減少第1種誤差對實驗結(jié)果的誤導.