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  • 如何尋找與一已知蛋白質(zhì)相互作用的蛋白質(zhì)?如何進(jìn)一步驗(yàn)證蛋白質(zhì)之間是否確實(shí)存在相互作用(細(xì)胞內(nèi)/細(xì)胞外?直接作用還是間接作用)?

    如何尋找與一已知蛋白質(zhì)相互作用的蛋白質(zhì)?如何進(jìn)一步驗(yàn)證蛋白質(zhì)之間是否確實(shí)存在相互作用(細(xì)胞內(nèi)/細(xì)胞外?直接作用還是間接作用)?
    語(yǔ)文人氣:479 ℃時(shí)間:2020-07-28 14:04:41
    優(yōu)質(zhì)解答
    首先你得知道到哪里去找那個(gè)未知的蛋白(比如是哪個(gè)生物,哪種細(xì)胞內(nèi));
    然后可以做CoIP(中文可能是什么共沉淀),用針對(duì)那個(gè)已知蛋白的抗體去從細(xì)胞裂解液中抓出未知的蛋白;或者,把已知蛋白聯(lián)到beads上,也可以抓出未知蛋白,這叫pull-down assay;
    至于驗(yàn)證蛋白間的作用么,細(xì)胞內(nèi)(in vivo)可以用FRET,或in situ PLA;細(xì)胞外(in vitro)么還是用pull-down,要用一定濃度的鹽去洗,要不然可能是非特異性結(jié)合的.
    你指的間接作用是指有別的蛋白做中間人?那就看你抓出來(lái)多少東西了~
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