斐林試劑和雙縮脲試劑都由NaOH溶液和CuSO4溶液組成,但二者有如下三點(diǎn)不同:
(1)溶液濃度不同
斐林試劑中NaOH溶液稱為斐林試劑甲,其濃度為0.1g/ml,CuSO4溶液稱為斐林試劑乙,其濃度為0.05g/ml;雙縮脲試劑中NaOH溶液(雙縮脲試劑A)的濃度為0.1g/ml,CuSO4溶液(雙縮脲試劑B)的濃度為0.01g/ml.
(2)使用原理不同
斐林試劑是新配制的Cu(OH)2溶液,它在加熱條件下與醛基反應(yīng),被還原成磚紅色的Cu2O沉淀,可用于鑒定可溶性還原糖的存在.用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時(shí),溶液的顏色變化過(guò)程為:淺藍(lán)色→棕色→磚紅色(沉淀).
鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時(shí),常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑,發(fā)生的是雙縮脲反應(yīng).雙縮脲反應(yīng)實(shí)質(zhì)是在堿性環(huán)境下的Cu2+與雙縮脲試劑發(fā)生的紫色反應(yīng).而蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲(H2NOC-NH-CONH2)結(jié)構(gòu)相似的肽鍵,所以蛋白質(zhì)都能與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng),可以用雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)的存在.
(3)使用方法不同
斐林試劑使用時(shí),先將 NaOH溶液和CuSO4溶液混合(將4~5滴CuSO4溶液滴入2mlNaOH溶液中),而后立即使用:雙縮脲試劑使用時(shí),先加入NaOH溶液(2mL),振蕩搖勻,造成堿性的反應(yīng)環(huán)境,然后再加入3~4滴CuSO4溶液,振蕩搖勻后觀察現(xiàn)象.
斐林試劑與雙縮脲試劑相同嗎
斐林試劑與雙縮脲試劑相同嗎
生物人氣:506 ℃時(shí)間:2020-03-28 06:47:05
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