博凌科為原理取經(jīng)一定稀釋的細(xì)胞或小孢子原生質(zhì)體懸液,把它注入血球記數(shù)板的記數(shù)室中,然后在顯微鏡下逐格計數(shù).因為記數(shù)板是一塊特制的載波片.其上由四條平行槽 構(gòu)成的三個平行臺,中間的平臺較寬,此平臺的中間又被一短槽隔成兩半,每邊平臺上面各刻有一個方格網(wǎng),每個方格網(wǎng)共分九大格,中央大格即為此計數(shù)板的計數(shù) 室.計數(shù)室的邊長為1mm.中間平臺下陷0.1mm,蓋上蓋片后計數(shù)室的容積為 0.1mm.所以,可根據(jù)在顯微鏡下觀察到的細(xì)胞數(shù)目,換算成單位體積中細(xì)胞的數(shù)量.常用血球記數(shù)板的計數(shù)室有兩種規(guī)格：一種是一個大方格分成16個中方 格,而每個中方格又分成25 個小方格；另一種是一個大方格分成25個中方格,而每個中方格又分成16個小方格.不管是那種規(guī)格,其計數(shù)室的小格數(shù)總是相同的,既由400個小方格組 成.計數(shù)時,通常只計5個中格的細(xì)胞數(shù)即可.操作步驟 樣品 取懸浮細(xì)胞小孢子或原生質(zhì)體懸液,稀釋到一定比例.檢 查記數(shù)板 在正式計數(shù)前,先用顯微鏡檢查記數(shù)板的計數(shù)室,看其是否沾有雜質(zhì)或干枯的菌體.若有污物,則需作以下幾步清洗：（1） 擦洗.用藥棉蘸取95%酒精,輕輕擦洗計數(shù)板的計數(shù)室.（2） 沖洗.用蒸餾水沖洗計數(shù)板,并用毛邊紙吸干其上的水分（注意：勿喲內(nèi)火焰來烤干）最后用擦鏡紙揩干凈.（3） 鏡檢.鏡檢清洗后的計數(shù)板,直至計數(shù)室無污物時,才可用于細(xì)胞的計數(shù).加樣 先將蓋波片安方在計數(shù)室上面,然后搖勻樣品取懸液,使它沿著蓋波片和計數(shù)板間的縫隙滲入計數(shù)室,連續(xù)2~3次,直至充滿計數(shù)室平臺為止.計數(shù) 將加好樣品的記數(shù)板置于顯微鏡載物臺的中央,然后按下列步驟操作：（1） 找計數(shù)室.先在低倍顯微鏡下尋找計數(shù)板上的大方格網(wǎng)位置.尋找時顯微鏡的光圈要適當(dāng)縮小,使視野偏暗.然后順著大方格線,移動計數(shù)板,使計數(shù)室位于視野中 間.（2） 轉(zhuǎn)高倍鏡.轉(zhuǎn)至高倍鏡后,適當(dāng)調(diào)節(jié)光度,使細(xì)胞和計數(shù)室線條均清晰為止.然后將計數(shù)室一角的中格移至視野中.（3）計數(shù).通常以計5個中格的細(xì)胞值來代表計數(shù)室中的細(xì)胞量.將凡要計數(shù)的中格中的細(xì)胞逐一計數(shù).計數(shù)時為了避免重復(fù)或遺漏,常將分布在格線上的菌體,一律以接觸方格底線和有側(cè)線上的菌作為計入本格內(nèi)的菌數(shù).以減少人為計數(shù)誤差.將計的細(xì)胞數(shù)填入表格中.（4） 清洗 計數(shù)完畢后,記數(shù)板先用95%酒精輕輕擦洗,再用蒸餾水淋洗,然后吸干,最后用擦鏡紙揩干凈.