簡(jiǎn)單染色法：利用單一染料對(duì)細(xì)菌進(jìn)行染色的一種方法.例如番紅.
1．涂片：用灼燒滅菌冷卻后的接種環(huán)挑取少量菌體與水滴充分混勻,涂成極薄的菌膜.
2．干燥：可自然晾干,或?qū)⑼科糜诨鹧娓咛幬岷娓?但不能直接在火焰上烘烤.
3．固定：手執(zhí)玻片一端,有菌膜的一面朝上,通過迅速通過火焰2-3次（用手指觸涂片反面,以不燙手為宜）.
4．染色：加適量(以蓋滿菌膜為度)結(jié)晶紫染色液(或石炭酸復(fù)紅液),染l～2min.
5．水洗：用自來沖洗至流下的水中無染色液的顏色時(shí)為止.
6．干燥
7．鏡檢
復(fù)染色：利用用兩種以上染料對(duì)細(xì)菌進(jìn)行染色.例如革蘭氏染色法.
革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個(gè)步驟,需要堿性染料（basic dye）初染液；媒染劑（mordant）；脫色劑（decolorising agent）和復(fù)染液（counterstain）.
　　堿性染料初染液的象在細(xì)菌的單染色法基本原理中所述的那樣,而用于革蘭氏染色的初染液一般是結(jié)晶紫（crystal violet）.媒染劑的作用是增加染料和細(xì)胞之間的親和性或附著力,即以某種方式幫助染料固定在細(xì)胞上,使不易脫落,碘（iodine ）是常用的媒染劑.脫色劑是將被染色的細(xì)胞進(jìn)行脫色,不同類型的細(xì)胞脫色反應(yīng)不同,有的能被脫色,有的則不能,脫色劑常用95%的酒精（ethanol）.復(fù)染液也是一種堿性染料,其顏色不同于初染液,復(fù)染的目的是使被脫色的細(xì)胞染上不同于初染液的顏色,而未被脫色的細(xì)胞仍然保持初染的顏色,而且將細(xì)胞區(qū)分成G+和G-兩大類群,常用的復(fù)染液為番紅.
1.載玻片固定.在無菌操作條件下,用接種環(huán)挑取少量細(xì)菌于干凈的載玻片上涂布均勻,在火焰上加熱以殺死菌種并使其粘附固定.
2.草酸銨結(jié)晶紫染1分鐘.
3.自來水沖洗,去掉浮色.
4.用碘-碘化鉀溶液媒染1分鐘,傾去多余溶液.
5.用中性脫色劑如乙醇（95%）或丙酮酸脫色30秒,革蘭氏陽性菌不被褪色而呈紫色,革蘭氏陰性菌被褪色而呈無色.
6.用番紅染液或者沙黃復(fù)染30秒,革蘭氏陽性菌仍呈紫色,革蘭氏陰性菌則呈現(xiàn)紅色.