分子生物學(xué)試題：已知原核生物的A、B、C三個(gè)基因的序列,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)證明這三個(gè)基因在同一個(gè)操縱子上,

分子生物學(xué)試題：已知原核生物的A、B、C三個(gè)基因的序列,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)證明這三個(gè)基因在同一個(gè)操縱子上,
并且找出這三個(gè)基因的排列順序?
找出這三個(gè)基因的順序如ABC或其他。老師說(shuō)是利用mRNA提取——用RT-PCR合成cDNA——用得到的cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增——最后對(duì)得到DNA進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳觀察，而且關(guān)鍵在中間第二步的引物設(shè)計(jì)。但我不能明白具體的原理。

其他人氣：828 ℃時(shí)間：2020-06-22 13:21:20

優(yōu)質(zhì)解答

咳,是這樣,原核生物沒(méi)有內(nèi)含子,不會(huì)有擴(kuò)增上面的影響,比如引物結(jié)合的位置不對(duì)引起的后續(xù)這種.這個(gè)問(wèn)題其實(shí)沒(méi)那么復(fù)雜,假定這個(gè)基因序列是ABC,如果設(shè)計(jì)了A的引物,擴(kuò)增出來(lái)的產(chǎn)物就主要是含有ABC的大片段；如果是設(shè)計(jì)B的引物,就有BC的片段；如果是C的引物,就只是C的片段,在大小上就能分離出來(lái).你用marker估算一下三種片段的大小,M（abc）-M（bc）=M（a）,同樣的M（bc）-M（c）=M（b）,你再與自己已知的大小對(duì)照一下.

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