關于Sanger法測DNA序列的一個小問題~
關于Sanger法測DNA序列的一個小問題~
為什么要用放射性同位素標記任意一種dNTP,而不是引物或ddNTP?我覺得如果在某條鏈終止前沒有該種被標記的dNTP,那么在最后放射自顯影是不就無法顯示這條核苷酸嗎?比方說GGACTTC這條鏈,如果終止在GGAddC處,而標記的核苷酸是dTTP,那么最后它能顯示出來嗎?
為什么要用放射性同位素標記任意一種dNTP,而不是引物或ddNTP?我覺得如果在某條鏈終止前沒有該種被標記的dNTP,那么在最后放射自顯影是不就無法顯示這條核苷酸嗎?比方說GGACTTC這條鏈,如果終止在GGAddC處,而標記的核苷酸是dTTP,那么最后它能顯示出來嗎?
生物人氣：306 ℃時間：2020-04-25 00:23:16
優(yōu)質解答
測序的時候,加入的ddNTP是少量的,而dNTP都是過量的.4種普通dNTP中加入少量的一種ddNTP后,發(fā)生的其實是正常的鏈的延伸與偶然發(fā)生的ddNTP摻入導致的鏈的終止之間的競爭.分析你舉的GGACTTC的例子,在加入ddC的試管,會出...
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