包涵體蛋白超聲裂解后,通過離心能將細(xì)胞碎片去除嗎,怎樣的方法能得到比較純的包涵體可以進(jìn)行稱量計(jì)算
包涵體蛋白超聲裂解后,通過離心能將細(xì)胞碎片去除嗎,怎樣的方法能得到比較純的包涵體可以進(jìn)行稱量計(jì)算
生物人氣:996 ℃時(shí)間:2020-07-02 06:34:11
優(yōu)質(zhì)解答
梯度離心或者差速離心去除細(xì)胞碎片,一般1000r/min左右就差不多可以達(dá)到效果.包涵體是表達(dá)過快的蛋白來不及折疊而形成的蛋白團(tuán),所以一般蛋白純度能夠達(dá)到95%以上,用6M鹽酸胍就基本把包涵體分開,再超濾一下加上緩沖液就基本上很純了梯度離心,用什么,差速離心包涵體在沉淀里還是上層,包涵體和細(xì)胞的碎片重量差別會(huì)很大嗎一般是蔗糖吧。包涵體是在沉淀里面,和細(xì)胞膜之類的膜結(jié)構(gòu)以及一些多糖結(jié)構(gòu)來說,包涵體蛋白的比重肯定要大得多,不過,具體離心的效果還得參照跑膠的結(jié)果進(jìn)行改進(jìn)。用蔗糖梯度離心一般能達(dá)到多少的純度
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