我的那本微生物的書上有,但是太多了.我就偷懶一下,那個你先看看,若不行,我再翻書~
7　操作步驟
7.1　檢樣稀釋及培養(yǎng)
7.1.1以無菌操作,取樣25mL或25 g放入225mL滅菌生理鹽水中,經(jīng)充分振搖作成1：10均勻稀釋液.
固體檢樣在加入稀釋液后,最好置均質(zhì)器中以8000r/min～10000r/min的速度處理1min,做成1:10的均勻稀釋液.
7.1.2　用1mL滅菌吸管吸取1∶10稀釋液1mL,沿管壁徐徐注入含有9mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(nèi)(注意吸管尖端不要觸及管內(nèi)稀釋液),振搖試管,混合均勻,做成1∶100的稀釋液.
7.1.3　另取1mL滅菌吸管,按上條操作順序,做10倍遞增稀釋液,如此每遞增稀釋一次,即換用1支1mL火菌吸管.
7.1.4　根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)?biāo)本污染情況的估計,選擇2～3個適宜稀釋度,分別在做10倍遞增稀釋的同時,即以吸取該稀釋度的吸管移1mL稀釋液于滅菌平皿內(nèi),每個稀釋度做兩個平皿.
7.1.5　稀釋液移入平皿后,應(yīng)及時將涼至46℃營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(可放置于46±1℃水浴保溫)注入平皿約15mL,并轉(zhuǎn)動平皿使混合均勻.同時將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1mL稀釋液的滅菌平皿內(nèi)作空白對照
7.1.6　待瓊脂凝固后,翻轉(zhuǎn)平板,置36±1℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)48±2h.
7.2　菌落計數(shù)方法
　　做平板菌落計數(shù)時,可用肉眼觀查,必要時用放大鏡檢查,以防遺漏.在記下各平板的菌落數(shù)后,求出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù).
7.3　菌落計數(shù)的報告
7.3.1　平板菌落數(shù)的選擇
　　選取菌落數(shù)在30～300之間的平板作為菌落總數(shù)測定標(biāo)準(zhǔn).一個稀釋度使用兩個平板,應(yīng)采用兩個平板平均數(shù),其中一個平板有較大片狀菌落生長時,則不宜采用,而應(yīng)以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數(shù),若片狀菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均勻,即可計算半個平板后乘2以代表全皿菌落數(shù).平皿內(nèi)如有鏈狀菌落生長時(菌落之間無明顯界線),若僅有一條鏈,可視為一個菌落；如果有不同來源的幾條鏈,則應(yīng)將每條鏈作為一個菌落計.
7.3.2　稀釋度的選擇
7.3.2.1　應(yīng)選擇平均菌落數(shù)在30～300之間的稀釋度,乘以稀釋倍數(shù)報告之(見表1中例1).
7.3.2.2　若有兩個稀釋度,其生長的菌落數(shù)均在30～300之間,則視兩者之比如何來決定.若其比值小于或等于2,應(yīng)報告其平均數(shù)；若大于2則報告其中較小的數(shù)字(見表中例2及3).
7.3.2.3　若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300,則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之(見表1中例4).
7.3.2.4　若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30,則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之(見表1中例5).
7.3.2.5　若所有稀釋度均無菌落生長,則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)報告之(見表1中例6).
7.3.2.6　若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30～300之間,其中一部分大于300或小于30時,則以最接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之