引物18個堿基互補序列,Tm值60左右,加上酶切位點和保護堿基后,Tm值就72了,這么高Tm行嗎?
引物18個堿基互補序列,Tm值60左右,加上酶切位點和保護堿基后,Tm值就72了,這么高Tm行嗎?
能幫我看下,這樣設(shè)計的引物對嗎ATGC TCTAGA GC TCAGATGTCCACGTCCCG前面四個和第11、12個（GC）是保護堿基,中間6個是酶切位點,后面20個是互補序列,我不確定在酶切位點后面還需不需要要加保護位點?
能幫我看下,這樣設(shè)計的引物對嗎ATGC TCTAGA GC TCAGATGTCCACGTCCCG前面四個和第11、12個（GC）是保護堿基,中間6個是酶切位點,后面20個是互補序列,我不確定在酶切位點后面還需不需要要加保護位點?
數(shù)學(xué)人氣：134 ℃時間：2020-02-05 06:11:53
優(yōu)質(zhì)解答
酶切位點后面緊接的引物其實就是保護堿基,所以后面的保護堿基可以去除,去掉這兩GCTm肯定會降低的
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