去哪里找最出色的生命科學學術交流論壇?>>> 用臺盼藍拒染法計數活細胞:
1. 徹底混合細胞懸液,取100礚樣本至一支試管中.
2. 臺盼藍染色有兩種方法.一是首先用細胞培養(yǎng)液稀釋細胞樣本,然后用臺盼藍溶液(產品號 #07050) 1/2稀釋樣本（細胞和臺盼藍的稀釋比為1:1）.或者直接用臺盼藍溶液稀釋樣本.
例如：1/40稀釋樣本
加入50礚 細胞懸液至950礚 IMDM+2% FBS (1/20 稀釋),混合,然后取100礚稀釋的細胞懸液加入100礚臺盼藍溶液中(終稀釋度為1/40).或取20礚細胞懸液加入780礚臺盼藍溶液中(終稀釋度為1/40).
3. 渦懸振蕩,混合稀釋的細胞樣本.
4. 血細胞計數器的準備：首先用酒精清潔其小室和蓋玻片,然后用脫脂綿擦干.
5. 仔細的將蓋玻片覆蓋兩個小室.
6. 用微量移液器或毛細管吸取稀釋的樣本.
7. 用微量移液器或毛細管將樣本充滿兩個小室.不要過滿或不足.
8. 計數4個大方格中細胞核的總數(1x1x0.1mm)或>100個細胞.分別死細胞和活細胞.死細胞染成藍色的死細胞(因為細胞完整性破壞,細胞吸收臺盼藍),活細胞透明有折光（未染色）.
9. 活細胞計數按以下方法計算：
每個方格中活細胞總數平均值x稀釋倍數x104= 活細胞數/mL
10.活細胞百分比計算方法如下：