污染的來源.植物組培污染主要是霉菌、細(xì)菌和酵母菌引起的污染.霉菌和酵母菌在培養(yǎng)條件下生長快,很容易觀察到,而細(xì)菌潛伏期長,植物組織一般不表現(xiàn)癥狀,所以很難在前期和肉眼觀察到[1].國外有關(guān)學(xué)者認(rèn)為細(xì)菌污染的來源主要有三個：一是材料內(nèi)部滅菌處理不好,這樣造成的污染占污染總數(shù)的1/3～1/2.二是在正常的滅菌的條件下,內(nèi)生菌能夠存活,這樣的污染占污染源的1/4.三是來自寄生植物的污染占1/4～1/2.同時認(rèn)為有些植物的昆蟲和螨蟲的體表帶有霉菌的孢子和細(xì)菌,在九、十月份是重要的污染源,因多種植物昆蟲處在大量繁殖階段,此時大量昆蟲造成的污染源最易造成組培污染的嚴(yán)重發(fā)生.近六年來,我們通過對獼猴桃、櫻桃、托柄菝葜及大花非洲菊初級培養(yǎng)污染的研究中發(fā)現(xiàn),高溫、多雨的環(huán)境更有利于污染的發(fā)生,而且隨著植物材料年齡的增長,植物材料的健康狀況不斷惡化,組培污染也會更加嚴(yán)重.另外,外植體的狀況,環(huán)境條件和操作過程也是引起污染的主要原因.
由于培養(yǎng)的植物材料大都采集于田間栽培植株,材料上常附有各種微生物,一旦被帶入培養(yǎng)基,即會迅速繁殖滋長,造成污染,培養(yǎng)失敗.所以培養(yǎng)前必須對外植體進行嚴(yán)格的消毒處理,消毒的尺度為既能全都?xì)缤庵搀w上附帶的微生物,但又不傷害材料的生活力.因此,必須正確選擇消毒劑和使用的濃度、處理時間及程序.目前,常用的消毒劑有次氯酸鈣、氯化汞、次氯酸鈉、雙氧水、酒精（70％）等.具體消毒方法如下：
（1）莖尖、莖、葉片的消毒消毒前先用清水漂洗干凈或用軟毛刷將塵埃刷除,茸毛較多的用皂液洗滌,然后再用清水洗去皂液,洗后用吸水紙吸干表面水分,用70％酒精浸數(shù)秒鐘,取出后及時用10％次氯酸鈣飽和上清液浸泡10～20分鐘.或用2％～10％次氯酸鈉溶液浸泡6～15分鐘.消毒后用無菌水沖洗3次,用無菌紗布或無菌紙吸干接種.
（2）根、塊莖、鱗莖的消毒這類材料大都生長在土中,常帶有泥土,挖取時易遭損傷.消毒前必須先用凈水清洗干凈,在凹凸不平處以及鱗片縫隙處,均用毛筆或軟刷將污物清除干凈,用吸水紙吸干后,在70％酒精中浸一下,然后用6％～10％次氯酸鈉溶液浸5～15分鐘,或用0．1％～0．2％氯化汞消毒5～10分鐘,最后用無菌水清洗3～4次,用無菌紗布或無菌紙吸干后接種.
（3）果實、種子的消毒這類材料有的表皮上具有茸毛或蠟質(zhì),消毒前先用70％酒精浸泡幾秒鐘或2～10分鐘,然后用飽和漂白粉上清液消毒10～30分鐘或2％次氯酸鈉溶液浸10～20分鐘,消毒后去除果皮,取出內(nèi)部組織或種子接種.直接用種子或果實消毒,經(jīng)消毒后的材料均須用無菌水多次沖洗后接種.
（4）花藥、花粉的消毒植物的花藥外面常被花瓣、花萼包裹著,一般處于無菌狀態(tài),只需采用表面消毒即可接種.通常先用70％酒精棉球擦拭花蕾或葉鞘,然后將花蕾剝出,在飽和漂白粉上清液中浸泡10～15分鐘,用無菌水沖洗2～3次,吸干后即可接種.