一、培養(yǎng)材料的采集
組織培養(yǎng)所用的材料非常廣泛,可采取根、莖、葉、花、芽和種子的子葉,有時(shí)也利用花粉粒和花藥,其中根尖不易滅菌,一般很少采用.
對于木本花卉來說,闊葉樹可在一、二年生的枝條上采集,針葉樹種多采種子內(nèi)的子葉或胚軸,草本植物多采集莖尖.
在快速繁殖中,最常用的培養(yǎng)材料是莖尖,通常切塊在0.5厘米左右,如果為培養(yǎng)無病毒苗而采用的培養(yǎng)材料通常僅取莖尖的分生組織部分,其長度在0.1毫米以下.
二、培養(yǎng)材料的消毒
（一）先將材料用流水沖洗干凈,最后一遍用蒸餾水沖洗,再用無菌紗布或吸水紙將材料上的水分吸干,并用消毒刀片切成小塊.
（二）在無菌壞境中將材料放入70％灑精中浸泡30－60秒.
（三）再將材料移入漂白粉的飽和液或0.01％升汞水中消毒10分鐘.
（四）取出后用無菌水沖洗三、四次.
三、制備外植體
將已消毒的材料,用無菌刀、剪、鑷等,在無菌的環(huán)境下,剝?nèi)パ康镊[片、嫩枝的外皮和種皮胚乳等,葉片則不需剝皮.然后切成0.2－0.5厘米厚的小片,這就是外植體.在操作中嚴(yán)禁用手觸動材料.
四、接種和培養(yǎng)
（一）接種
在無菌壞境下,將切好的外植體立即接在培養(yǎng)基上,每瓶接種4－10個(gè).
（二）封口
接種后,瓶、管用無菌藥棉或蓋封口,培養(yǎng)皿用無菌膠帶封口.
（三）溫度
培養(yǎng)基大多應(yīng)保持在25℃左右,但要因花卉種類及材料部位的不同而區(qū)別對待.
（四）增殖
外植體的增殖是組培的關(guān)鍵階段,在新梢等形成后為了擴(kuò)大繁殖系數(shù),需要繼代培養(yǎng).把材料分株或切段轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基中,增殖培養(yǎng)基一般在分化培養(yǎng)基上加以改良,以利于增殖率的提高.增殖1個(gè)月左右后,可視情況進(jìn)行再增殖.
（五）根的誘導(dǎo)
繼代培養(yǎng)形成的不定芽和側(cè)芽等一般沒有根,必須轉(zhuǎn)到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng).1個(gè)月后即可獲得鍵壯根系.
五、組培苗的練苗移栽
試管苗從無菌到光、溫、濕穩(wěn)定的環(huán)境進(jìn)入自然環(huán)境,必須進(jìn)行煉苗.一般移植前,先將培養(yǎng)容器打開,于室內(nèi)自然光照下放3天,然后取出小苗,用自來水把根系上的營養(yǎng)基沖洗干凈,再栽入已準(zhǔn)備好的基質(zhì)中,基質(zhì)使用前最好消毒.移栽前要適當(dāng)遮蔭,加強(qiáng)水分管理,保持較高的空氣濕度（相對濕度98％左右）,但基質(zhì)不宜過濕,以防爛苗.太多啦。一、培養(yǎng)材料的采集 取莖尖的分生組織部分，其長度在0.1毫米以下。二、培養(yǎng)材料的消毒 三、制備外植體 四、接種和培養(yǎng) 五、組培苗的練苗移栽