Km等于酶促反應(yīng)速度為最大反應(yīng)速度一半時(shí)的底物濃度,即當(dāng)V=Vm/2時(shí),【S】=Km,單位為mol/l.Km是酶極為重要的動(dòng)力學(xué)參數(shù),其物理含義是指ES復(fù)合物的消失速度常數(shù)（k-1+k2）與形成速度常數(shù)（k1）之比.當(dāng)PH、溫度、離子強(qiáng)度不變時(shí),Km是恒定的.
2意義編輯
米氏常數(shù)
圖示以及公式推導(dǎo).它可以表示酶和底物之間的親和能力,Km值越大,親和能力越弱,反之亦然.它可以確定一條代謝途徑中的限速步驟：代謝途徑是指由一系列彼此密切相關(guān)的生化反應(yīng)組成的代謝過(guò)程,前面一步反應(yīng)的產(chǎn)物正好是后面一步反應(yīng)的底物,例如,EMP途徑.限速步驟就是一條代謝途徑中反應(yīng)最慢的那一步,Km值最大的那一步反應(yīng)就是,該酶也叫這條途徑的關(guān)鍵酶.它可以用來(lái)判斷酶的最適底物,某些酶可以催化幾種不同的生化反應(yīng),叫多功能酶,其中Km值最小的那個(gè)反應(yīng)的底物就是酶的最適底物.Km是一種酶的特征常數(shù),只與酶的種類(lèi)有關(guān)而與酶的濃度無(wú)關(guān),與底物的濃度也無(wú)關(guān),這一點(diǎn)與Vm是不同的,因此,我們可以通過(guò)Km值來(lái)鑒別酶的種類(lèi).但是它會(huì)隨著反應(yīng)條件（T、PH）的改變而改變.非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑米氏常數(shù)不變,最大反應(yīng)速度減?。环锤?jìng)爭(zhēng)性抑制劑米氏常數(shù)減小,最大反應(yīng)速度減小
Km的意義及應(yīng)用
（1）、活性中心被底物占據(jù)一半時(shí)的底物濃度.當(dāng)V=1/2Vmax時(shí),Km=[S].
（2）、Km是特征常數(shù),一般只與酶的性質(zhì)、底物種類(lèi)及反應(yīng)條件有關(guān),與酶的濃度無(wú)關(guān).
（3）、Km可近似表示表示酶與底物的親和力
Km=(K2+K3)/K1=Ks+K3/K1
當(dāng)K1、K2>>K3時(shí),Km近似等于Ks,因此,1/Km可近似表示酶與底物的親和力大小
（4）、Km與天然底物
Km最小或最高Vm/Km比值的底物稱(chēng)之為該酶的最適底物或天然底物.
（5）、已知Km,可根據(jù)[S]推算V,或由V推算[S]
（6）、了解酶的Km及[S]推知是否受[S]調(diào)節(jié)
（7）、用于鑒別原級(jí)同工酶、次級(jí)同工酶.
（8）、測(cè)定不同抑制劑對(duì)某個(gè)酶的Km值的影響判斷抑制類(lèi)型（非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑米氏常數(shù)不變,最大反應(yīng)速度減??；競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑米氏常數(shù)增大,最大反應(yīng)速度不變.）
（9）、催化可逆反應(yīng)的酶：測(cè)定Km和[S]推測(cè)催化反應(yīng)的方向及程度.