（1）分頁：將不同的引物（基因）分在不同的頁；（2）將來自相同模板的名字一樣,可以定義為1234...；例如：P1（引物）P2P3P4WT：calibratorActin(1)A(1)B(1)C(1)MT1：unknown1Actin(2)A(2)B(2)C(2)MT2：unknown2Actin(3)A(3)B(3)C(3) 說明：（1）P1：引物1,擴(kuò)增相同的基因；（2）WT：calibrator 對照組樣本,例如：野生型WT（Wild type）；（3）MT：unknown 未知組樣本或處理組樣本或待測組樣本,例如突變型MT（Mutant type）.數(shù)據(jù)分析時,選用Quantation 直接出原始圖；選用2-△△Ct方法,然后根據(jù)提示選擇：Analysis - Others - Delta Delta CT Relative Quatatition - validation performed、Gene Interest Quantitation 、Normalizer Quantitation 和Calibrator Defined 出相對定量柱狀圖；選擇2 Standard Curves Relative Quantitation ,然后根據(jù)提示選擇：Gene Interest StandardCurve、Normalizer Stard Curve和Calibrator Defined 出相對定量柱狀圖.2、MX3000P熒光定量PCR儀：軟件：MxPro根據(jù)樣本來源和待擴(kuò)增基因分類如下：Assoc.symbolSample：樣本來源NormalizerGene of InterestGene of InterestAWT（Calibrator對照組）ActinGene1Gene2BMT1 (unknown1待測組)ActinGene1Gene2CMT2 (unknown2待測組)ActinGene1Gene2DMT3 (unknown3待測組)ActinGene1Gene2EMT4 (unknown4待測組)ActinGene1Gene2操作步驟：進(jìn)入軟件主頁 --- 選擇“comparative quantitation” --- well type 選擇（Calibrator：如WT；Unknown：如MT）--- 選擇：sybr / reference：rox --- 選擇Normalizeing assay（看家/內(nèi)參基因組） --- 然后將選擇Assoc.symbol將相同樣本來源的樣品孔綁定起來；擴(kuò)增程序設(shè)計；結(jié)果分析：選定Calibrator 和 Unknown組的內(nèi)參基因和感興趣基因,結(jié)果分析即可得到柱狀圖.