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  • 熒光定量RT-PCR

    熒光定量RT-PCR
    可以在不同的反應(yīng)管里加不同的探針,在一個(gè)反應(yīng)板上同時(shí)做么?
    如果可以,需要滿足什么條件呢?
    探針設(shè)計(jì)的注意事項(xiàng)都有什么啊?
    數(shù)學(xué)人氣:513 ℃時(shí)間:2020-05-18 06:56:31
    優(yōu)質(zhì)解答
    可以,這個(gè)叫做多重PCR,要求是你的探針是不同熒光檢測(cè)的.
    但是,還需要你進(jìn)行條件的優(yōu)化.
    個(gè)人認(rèn)為優(yōu)化比較麻煩,而且還不如分開(kāi)做的準(zhǔn)確.我不是要把不同的探針加到同一個(gè)反應(yīng)管里,我是想問(wèn),在不同的反應(yīng)管里加單一探針,但是彼此加的探針不同,是否可以同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)。需要滿足什么條件可以的.你在選擇plate的時(shí)候,不同的孔選擇相對(duì)應(yīng)的探針類(lèi)型就可以了.比如有的探針是FAM的,你就選擇FAM再選擇掃描的孔;有的探針是HEX,你接著選擇HEX后再選擇掃描的孔.沒(méi)有什么特別的條件.如果標(biāo)記的熒光基團(tuán)相同,用的引物不同,也可以么。因?yàn)槲倚枰?4種不同探針。那就更可以了呀!只要你的探針是一個(gè)孔一個(gè)就沒(méi)問(wèn)題.如果非要說(shuō)什么條件,那就是在同樣的PCR程序下,你的引物(不包括探針)能很好的擴(kuò)增,并且融解曲線只有一個(gè)峰.也就是說(shuō)你的不同的引物能夠滿足同一個(gè)PCR程序.
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